Pull-Down是體外驗證蛋白與蛋白互作關系的分子生物學實驗技術之一。該技術主要原理是將GST融合蛋白作為誘餌蛋白,其可與固定在固相支持物上的GSH(谷胱甘肽)結合,與蛋白樣品或細胞/組織裂解液共孵育,即可捕獲樣品中與誘餌蛋白互作的蛋白。接著通過洗滌或洗脫過程去除其余物質,并將捕獲的蛋白回收,進行WB或質譜等檢測分析,從而證實兩種蛋白間的互作關系或純化出相應的目的蛋白。

Pull-Down技術可以通過體外分析出蛋白與蛋白之間的互作關系;可以與酵母雙雜交以及BiFC結果相互驗證;亦可用于未知蛋白的鑒定。
服務流程:客戶提交實驗詳細信息—對客戶提交信息和材料的確認—對組織蛋白的提取及蛋白樣品的處理—構建蛋白純化載體—蛋白純化—pull-down實驗-WB驗證/質譜鑒定—撰寫提交實驗報告。
(1)提供目標蛋白表達載體序列信息(有質粒構建步驟才有);
(2)蛋白純化詳細實驗步驟(有蛋白純化步驟才有);
(3)pull-down過程詳細實驗步驟;
(4)Western Blot檢測結果;
(5)銀染結果與質譜原始數據(有質譜鑒定項目才有);